Zeitschrift für HIV und Retroviren Offener Zugang

Abstrakt

Ein Hochdurchsatz- und Multiplex-Mikrosphären-Immunoassay auf Basis des nichtstrukturellen Proteins 1 unterscheidet drei Flavivirus-Infektionen

Wei-Kung Wang

Die vier Serotypen des Dengue-Virus (DENV) sind die häufigste Ursache für Arbovirus-Infektionen beim Menschen. Die jüngsten Ausbrüche des Zika-Virus (ZIKV) und die damit verbundenen Komplikationen in DENV-endemischen Regionen unterstreichen den dringenden Bedarf an empfindlichen und spezifischen serodiagnostischen Tests. ZIKV und DENV gehören zur Gattung Flavivirus der Familie Flaviviridae. Herkömmliche serologische Tests auf Basis von Hüllproteinen für Flavivirus-Infektionen wurden durch eine ausgeprägte Kreuzreaktivität zwischen verschiedenen Flaviviren beeinträchtigt. In dieser Studie haben wir einen hochdurchsatzfähigen und Multiplex-IgG-Mikrosphären-Immunoassay (MIA) unter Verwendung der NS1-Proteine ​​von DENV1-DENV4, ZIKV und West-Nil-Virus (WNV) entwickelt, um Proben von durch Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion bestätigten Fällen zu testen, darunter primäre DENV1-, DENV2-, DENV3-, WNV- und ZIKV-Infektionen, sekundäre DENV-Infektionen und ZIKV-Infektionen mit vorheriger DENV-Infektion. Die Kombination von vier DENV NS1 IgG MIAs ergab eine Sensitivität von 94,3 % und eine Spezifität von 97,2 % zum Nachweis einer DENV-Infektion. Die ZIKV- und WNV NS1 IgG MIAs hatten eine Sensitivität/Spezifität von 100 %/87,9 % bzw. 86,1 %/78,4 %. Es wurde eine positive Korrelation zwischen den Ergebnissen des Enzymimmunoassays und des MIA für verschiedene getestete NS1 festgestellt. In Übereinstimmung mit unseren früheren Berichten (Tsai et al. Clin Infect Dis 2017, 65:1829-1836; Emerg Infect Dis 2018, 24: 1355-1359) reagierte das sekundäre DENV-Infektionspanel mit ZIKV NS1 in IgG MIA, und eine ZIKV-Infektion mit einem früheren DENV-Infektionspanel erkannte sowohl DENV als auch ZIKV NS1. Basierend auf dem Verhältnis der relativen mittleren Fluoreszenzintensität von ZIKV NS1 zu DENV1 NS1 kann der IgG MIA eine ZIKV-Infektion von einer früheren DENV-Infektion und einer sekundären DENV-Infektion mit einer Sensitivität von 88,9–90,0 % und einer Spezifität von 91,7–100,0 % unterscheiden. Der Multiplex- und Hochdurchsatztest könnte zur Serodiagnose und Seroüberwachung von DENV-, ZIKV- und WNV-Infektionen in endemischen Regionen eingesetzt werden.