American Journal of Drug Delivery and Therapeutics Offener Zugang

Abstrakt

Trennung ausgewählter Substanzen pflanzlichen Ursprungs mittels Umkehrphasen-Dünnschichtchromatographie bei kontrollierter mobiler Phasengeschwindigkeit und schrittweisem pH-Gradienten

Adrian Szczyrba, Aneta HaÅ?ka-GrysiÅ?ska*, Tadeusz H. Dzido

Heutzutage ist die Phytotherapie eine der am häufigsten verwendeten Lösungen in der Behandlung von leichten Symptomen und schweren Erkrankungen (z. B. Alzheimer-Krankheit) [1]. In Zeiten dynamischer Forschung nach neuen biologisch aktiven Substanzen pflanzlichen Ursprungs ermöglicht die Hochleistungsdünnschichtchromatographie (HPTLC) die schnelle und parallele Trennung zahlreicher Proben. Die Planarchromatographie wird gerne für Screening-Analysen von Pflanzenextrakten, pflanzlichen Arzneimitteln und neuen, durch Biotransformation gewonnenen Substanzen verwendet. Einige dieser neuen Substanzen besitzen Säure-Base-Eigenschaften (z. B. Alkaloide). In wässrigen Lösungen können sie dissoziieren und vielfältige Wechselwirkungen ionisierter und nichtionisierter Formen der Verbindung mit der mobilen und stationären Phase aufweisen. Ein sehr wichtiges Instrument, das die Selektivität und Form der Peaks/Flecken solcher Substanzen beeinflusst, ist der pH-Wert. Gepufferte Eluenten wurden üblicherweise bei der Trennung von Substanzen mit ionogenen Gruppen mittels Hochleistungssäulenchromatographie (HPLC) und Planarchromatographie (DC) verwendet, [2][3] aber es gibt keine Beispiele für einen pH-Gradienten des Eluenten in der Umkehrphasen-Hochleistungsdünnschichtchromatographie (RP-HPTLC). 

Unsere Forschungsgruppe schlägt die Implementierung eines Prototypgeräts vor, das auf der Anwendung einer beweglichen Pipette basiert, die von einem 3D-Druckermechanismus angetrieben wird, um ein Chromatogramm zu entwickeln. Das Gerät ermöglicht die Entwicklung von pH-Gradienten-Dünnschichtchromatogrammen in einem Umkehrphasensystem mit kontrollierter Lösungsmittelgeschwindigkeit ohne übermäßigen Fluss des Eluenten auf der Oberfläche der Adsorptionsschicht [4]. In der Studie wurde eine schrittweise pH-Gradientenelution zur Trennung ausgewählter Substanzen mit schwachen Baseneigenschaften verwendet. Die Verwendung des pH-Gradienten der mobilen Phase hat die Selektivität der Trennung und die Form der Flecken/Zonen der ausgewählten Substanzen verbessert.

Als stationäre Phase wurden HPTLC RP-18W Chromatographieglasplatten (Merck) verwendet. Die mobile Phase bestand aus Methanol und einem wässrigen Puffer mit einem geeigneten pH-Wert im Bereich von 2,5 bis 10,5. Die erhaltenen pH-Gradientenchromatogramme werden angezeigt. Die Vor- und Nachteile der vorgeschlagenen Lösung werden diskutiert.